propósito y alcance:
Los organismos que contienen citocromo producen una enzima oxidasa intracelular. Esta enzima oxidasa cataliza la oxidación del citocromo C. Los organismos que contienen citocromo C como parte de su cadena respiratoria son oxidasa-positivos y tornan el reactivo azul/púrpura. Los organismos que carecen de citocromo c como parte de su cadena respiratoria No oxidan el reactivo, dejándolo incoloro dentro de los límites de la prueba, y son oxidasa negativa.,
Las tiras OxiStrips™ Oxidase están listas para usar con un cómodo mango de plástico para que el usuario pueda evitar el contacto de la piel con el área de reacción.
reactivos y Suministros:
- Hardy Oxistrips test kit
- Sterile H2o
- Sterile inoculating loop or stick
almacenamiento de reactivos
- Tras su recepción, almacene a 15-30 grados C.
- Los Productos no deben usarse si hay signos de deterioro o si la fecha de caducidad ha pasado.
- guarde OxiStrips™ y OxiSticks™ con un desecante en el vial en todo momento.,
- la fecha de caducidad se aplica al producto en su embalaje intacto cuando se almacena como se indica.
control de calidad:
el control de calidad se realiza cada día que se realiza la prueba. Procedimiento de uso con cultivo de P aeruginosa ATCC 27853 (oxidasa positiva) y E. coli (ATCC 25922) (oxidasa negativa).
Registre los resultados del control de calidad en el registro del control de calidad de la prueba de oxidasa.
procedimiento
- coloque la tira de prueba de oxidasa en una placa de petri y humedezca con agua una zona de la tira a analizar. No saturar la tira.,
- Con un asa de inoculación estéril o una barra aplicadora de madera, frote una pasta bacteriana de 3-4 colonias bien aisladas sobre el área humedecida. Use colonias que tengan entre 18 y 24 horas de edad.
- La aparición de un color azul / púrpura en 30 segundos indica un resultado positivo.
- importante: cualquier color que aparezca después de este tiempo debe ser ignorado.
Limitaciones
la prueba de oxidasa puede utilizarse en la presunta identificación de Neisseria spp. y en la diferenciación e identificación de bacilos gramnegativos., Todos los organismos positivos a la oxidasa deben ser examinados por tinción de gram para determinar la morfología celular y la reacción de gram. Se recomiendan pruebas bioquímicas adicionales, utilizando cultivo puro, para una identificación completa.
El uso de nicrom u otros dispositivos de inoculación que contengan hierro puede causar reacciones positivas falsas.
Las reacciones de oxidasa de los bacilos gramnegativos deben determinarse en colonias obtenidas a partir de medios no selectivos y no diferenciales para garantizar resultados válidos.
La mayoría de Haemophilus spp. son oxidasa-positivos., Las tiras reactivas o reactivos de oxidasa menos sensibles pueden dar resultados falsos negativos.
los organismos débilmente oxidasa positivos, como Pasteurella multocida, pueden tardar más en mostrar una reacción positiva en las tiras reactivas.
Se recomienda usar colonias que tengan entre 18 y 24 horas de edad. Las colonias más viejas pueden producir reacciones más débiles.
la prueba de oxidasa debe realizarse en aislamientos a o por encima de 15-30 grados C.
cualquier desarrollo de color que aparezca después de 30 segundos de inoculación debe ser ignorado.