objectivo e âmbito: organismos contendo citocromo produzem uma enzima oxidase intracelular. Esta enzima oxidase catalisa a oxidação de organismos do citocromo C. que contêm citocromo c como parte de sua cadeia respiratória são oxidase-positivo e transformar o Reagente Azul/Roxo. Organismos sem citocromo c como parte de sua cadeia respiratória não oxidam o reagente, deixando-o incolor dentro dos limites do teste, e são oxidase-negativo.,as tiras de OxiStrips™ Oxidase estão prontas a utilizar tiras de ensaio com um cabo de plástico conveniente, para que o utilizador possa evitar o contacto da pele com a área de reacção.reagentes e fontes: ciclo de inoculação estéril ou stick esterilizados
Armazenamento De Reagente
- Após a recepção, A 15-30 graus C. Os produtos não devem ser utilizados se existirem sinais de deterioração ou se a data de expiração tiver passado.conservar OxiStrips™ e OxiSticks™ com um dessecante no frasco em qualquer altura.,
- a data de validade aplica-se ao produto na sua embalagem intacta quando armazenado de acordo com as instruções.
controlo de qualidade:
QC é realizado em cada dia que o teste é realizado. Use método com cultura de reserva de P aeruginosa ATCC 27853 (positivo à Oxidase) e E. coli (ATCC 25922) (negativo à Oxidase).registar os resultados de CQ no Registo de CQ de ensaio da Oxidase.procedimento
procedimento
- colocar a tira de ensaio oxidase numa placa de petri e humedecer uma área da tira a ensaiar com água. Não saturar a tira.,com um ciclo de inoculação esterilizado ou um bastão aplicador de madeira, borrar uma pasta bacteriana de 3 a 4 colónias bem isoladas para a zona humedecida. Use colônias que são 18-24 horas de idade.a aparência de uma cor azul / púrpura em 30 segundos indica um teste positivo.importante: qualquer cor que apareça após este tempo não deve ser tida em conta.
Limitações
O teste da oxidase pode ser utilizado na identificação presumível de Neisseria spp. e na diferenciação e identificação de bacilos gram-negativos., Todos os organismos oxidase-positivos devem ser examinados por coloração gram para determinar a morfologia celular e a reacção gram. Recomenda-se a realização de testes bioquímicos adicionais, utilizando cultura pura, para a identificação completa.
Usando nichrome ou outros dispositivos de inoculação contendo ferro pode causar reações falsas-positivas.as reacções Oxidase do bacilo gram-negativo devem ser determinadas em colónias obtidas a partir de meios não selectivos e não diferenciais, para assegurar resultados válidos.a maioria de Haemophilus spp. são oxidase-positivo., As tiras ou reagentes menos sensíveis da oxidase podem apresentar resultados falsos negativos.organismos positivos à oxidase fraca, como a Pasteurella multocida, podem demorar mais tempo a apresentar uma reacção positiva nas tiras de ensaio.recomenda-se a utilização de Colónias com idades entre os 18 e os 24 horas. Colónias mais antigas podem produzir reacções mais fracas.o ensaio da oxidase deve ser efectuado em isolados com temperaturas iguais ou superiores a 15-30 graus C. não deve ser tido em conta qualquer desenvolvimento de cor que surja após 30 segundos de inoculação.