G-proteïne-gekoppelde receptoren

G-proteïne–gekoppelde receptoren (GPCR ‘ s) reageren op extracellulaire stimuli, zoals hormonen, door interactie met een g-eiwit, waardoor een signaal door het membraan naar het cellulaire interieur wordt getransduceerd. Na de activering van GPCR, binden ga-subeenheden GTP en worden actief, die stroomafwaarts signalerende factoren zoals enzym adenylylcyclase (AC) verder activeren, die cyclisch-AMP (cAMP) samenstellen., De geactiveerde g-proteã nen interageren met stroomafwaartse signalerende factoren om de productie van tweede boodschappers zoals inositolphosphates, calcium, en cAMP te veranderen. GPCR ’s die de Gi-klasse van Ga-subeenheden activeren, remmen de productie van het kamp en GPCR’ s die de Gs-klasse van Ga-subeenheden activeren, activeren de productie van het kamp. cAMP, op zijn beurt, activeert het kamp-afhankelijke eiwitkinase, eiwitkinase A (PKA). De pKa-activeringsweg is een voorbeeld van een cascade van de signaaltransductie, waarin het binden van verscheidene signalerende gebeurtenissen samen het originele signaal binnen de cel versterkt., Voor elke geactiveerde molecule van GPCR, kunnen vele g-proteã nen worden geactiveerd, en kan elke actieve g-proteã ne vele kampmolecules samenstellen, die de cascade aan PKA en verder stroomafwaarts voortzetten.

GPCR ‘ s zijn sterk betrokken bij pituicyte-functies. Verminderde signalering werd aangetoond bij hypofyse-adenomen. GSA puntmutaties zijn aangetoond in GH-afscheidende slijmachtige tumoren .

Pertuit et al. GSA veranderingen in GH-afscheidende adenomas hebben wijd geanalyseerd.

de enige mutaties tot nu toe ondubbelzinnig geïdentificeerd en waargenomen in 30-40% van de GH-secreterende tumoren hebben betrekking op het sap-oncogeen., Ondanks de grote individuele variaties van GSA mRNAs, is het niveau van GSA-eiwitten altijd lager in gsp-positieve (gsp+) in vergelijking met GSP− negatieve (gsp -) tumoren . Er is eerder gesuggereerd dat de activering van Gsa een conformationele verandering veroorzaakt die zijn gehechtheid aan membranen verhindert en zijn degradatiesnelheid verhoogt, die proteasoom zou kunnen impliceren .

naast het sap-oncogeen is een overexpressie van het wtgsa-eiwit waargenomen in een subgroep van sap− adenomen. Ongeveer 60% van deze gsp− tumoren drukken hoge niveaus van Gsa uit in vergelijking met normale menselijke slijmachtige cellen., De GNAS locus (guanine nucleotide binding protein (G protein), alpha stimulating activity polypeptide 1), die in kaart brengt op menselijk chromosoom 20q13, bestaat uit een complex gebied met meerdere alternatieve gesplitste transcripten die coderen voor meerdere eiwitproducten. In de meeste menselijke weefsels wordt GSA biallelisch uitgedrukt, maar in specifieke weefsels wordt GSA bedrukt . In hypofysetumoren worden GSA-coderende transcripten monoallelisch uitgedrukt, voornamelijk uit het maternale allel . In bijna alle gevallen van sap+ somatotroph adenomen, treedt de GNAS-activerende mutatie op het actieve maternale allel op ., Het is bekend dat het genomic stempelen dysregulations de niveaus van de genuitdrukking kan beà nvloeden en zo aan tumorigenesis kan deelnemen. Een sterke bedrukking ontspanning, met een paternaal afgeleide expressie van Gsa, is alleen gevonden in gsp− tumoren. Andere mechanismen die de WtGsa-overexpressie zouden kunnen verklaren, moeten dus nog worden geïdentificeerd.

Gs-eiwitten koppelen hormonale stimulatie van verschillende receptoren op het celoppervlak aan de activering van AC . De activering van AC leidt tot de generatie van intracellular tweede-messengerkamp, dat PKA, de belangrijkste kampeffector bevordert., De phosphodiesterases (PDEs) dragen bij aan de complexiciteit en specificiteit van de Kampweg door het kamp te hydrolyseren. Het is nu duidelijk dat het kamp in cellen wordt gecompartimenteerd. In reactie op een verhoging van cAMP, kan PDEs direct door PKA (d.w.z., snelle terugkoppelingsregelgeving) en/of door inductie van PDE-gentranscriptie (d.w.z., regeling op lange termijn) worden geactiveerd . Aldus, is de spatiotemporele balans tussen PKA en PDE activiteiten een determinant in de controle van het kamp signaleren.,

In afwezigheid van PDE− remmers was er geen verschil in intracellulaire cAMP-spiegels tussen gsp+ en gsp-adenomen waarneembaar . Persani et al. aangetoond dat de transcripten van PDE4C en 4D, evenals die van PDE8, waren overexpressed in gsp+ tumors , die werden gecorreleerd met een zevenvoudige toename van PDE-activiteit. De twee nucleaire proteã nen, de CREBPROTEÃ ne en de inducible cAMP early repressor (ICER), zijn de belangrijkste en best-gekarakteriseerde definitieve doelstellingen van cAMP. De mRNA niveaus van de transcriptiefactoren CREB en ICER zijn beide verhoogd in de GSP + tumoren ., De phosphorylated CREB niveaus zijn gelijkaardig in de twee types van tumors, hoewel PDE blokkade een verhoging van P-CREB (PhosphoCREB) in gsp+ tumors veroorzaakt. Deze resultaten suggereren dat een toename van PDE-activiteit de activering van de cAMP-route zou kunnen tegengaan en een impact kan hebben op het fenotype van de gsp+ – tumoren .

naast veranderingen van de cAMP-pathway in gsp+ – tumoren, suggereren verscheidene aanwijzingen ook het bestaan van cAMP-pathway-veranderingen in GH-afscheidende adenomen die wtgsa overexpressie. Relatief hoge niveaus van CREB of ICER mRNAs zijn waargenomen in sommige sap-tumoren .,

De overexpressie van WtGsa verhoogt de accumulatie van intracellulaire cAMP en stimuleert de campweg (p-CREB-niveau). Een toename van CREB-afhankelijke transcriptie wordt ook waargenomen zowel in aanwezigheid van het sap-oncogeen als met de overexpressie van WtGsa in GH3-cellen .

om de rol van GSA veranderingen in de initiatie en progressie van de GH-secreterende adenomen nauwkeurig te bepalen, Pertuit et al., realiseerde een studie over hypofyse cellen, het vinden van dat de inductie van de uitdrukking van het sap oncogene initieert een aanzienlijke toename van de AC-activiteit, die wordt geassocieerd met een toename van het intracellulaire cAMP-niveau. Een zwakke maar langdurige activering van het AC, geassocieerd met een lichte verhoging van het kampniveau, wordt ook waargenomen als reactie op overexpressie van WtGsa. cAMP neemt geleidelijk af ondanks continue transgene expressie, wat wijst op een mogelijke betrokkenheid van de PDEs., Dit kan een tweede feedbackmechanisme zijn naast de posttranscriptionele verordening van het sap oncogeen .

deze mutaties remmen de GSA GTPase-activiteit, wat resulteert in GHRH ligand-onafhankelijke constitutieve activatie van cAMP, wat resulteert in GH-transcriptionele activatie en somatotroph proliferatie via een CREB in de GH-promotor .

Er zijn significant hogere hoeveelheden Ser133gefosforyleerd, en dus geactiveerde CREB, gemeld bij sommige hypofysetumoren die door GH worden uitgescheiden in vergelijking met de concentraties die worden gevonden bij niet-functionele (NF) tumoren., Deze verhoogde CREB-activiteit was duidelijk zelfs in tumoren die geen GSA-mutatie manifesteerden. Dit zou suggereren dat CREB activering kan plaatsvinden via een Gs-onafhankelijk mechanisme . Het is mogelijk dat de stimulerende/remmende polypeptiden en steroid hormonen die door hypothalamus en perifere endocriene organen worden vrijgegeven slijmachtige genuitdrukking en hormoonsecretie kunnen veranderen .