랩 4:Acid-Fast,포자 및 캡슐 얼룩

ACID-FAST

Acid-fast stain 차이 얼룩를 식별하는 데 사용되는 산 빠른 생물체의 멤버와 같이 속 Mycobacterium. Acid-fast 미생물의 특징은 왁스와 같은 거의 불침투성 세포벽;그들이 포함 mycolic 산과 대량의 지방산,왁스,그리고 복잡한 지질. 이 유형의 세포벽은 대부분의 화합물에 내성이 있으므로 산이 빠른 유기체는 특별한 염색 기술을 필요로합니다.,

주요 얼룩에서 사용 acid-fast 염색,carbol fuchsin,은 지용성 및 페놀이는 데 도움이 얼룩 침투 셀 벽입니다. 이것은 열(증기)의 형태로 열을 첨가함으로써 추가로 도움을받습니다. 증기는 밀랍 층을 느슨하게하는 데 도움이되며 세포 내부의 1 차 얼룩의 진입을 촉진합니다. 얼룩은 다음 세척과 매우 강한 decolorizer 는 스트립에서 얼룩의 모든 non-acid-fast 세포하지 않을 침투한 세포의 벽 acid-fast 체., 그런 다음 탈색 된 비 산성 고속 세포는 카운터 스테인을 차지하는데,이는 우리의 경우 메틸렌 블루입니다.나는 이것이 내가 할 수있는 유일한 방법이라고 생각한다. 쌍으로 작업하면서 아래 지시대로 3 개의 슬라이드를 준비하십시오(백업의 경우 2 개,얼룩의 경우 1 개).<피>2. 각 슬라이드에 레이블을 지정하고 왁스 연필로 슬라이드 중앙에 원을 그립니다.<피>3. 준비하는 에멀젼에서 각 슬라이드 4loopfuls 의 황색포도상구균 epidermidis 에서 귀하의 국물 문화에 슬라이드(이 될 것입니다 acid-fast 부정적인 박테리아).<피>4., 그런 다음 중 하나를 추가 loopful 의 진 chelonae(이들은 귀하의 산 빠르고 긍정적인 박테리아)및 혼합된 두 개의 박테리아를 함께.<피>5. 슬라이드 워머에서 슬라이드(들)가 공기 건조되도록하십시오(이 슬라이드가 건조되는 동안 포자 얼룩에 대한 슬라이드를 준비하십시오).<피>6. 일단 액체가 완전하게 증발하면,열은 당신의 화염을 통해서 그것을 3 시간 통과해서 박테리아를 고친다.<피>7. 비커 상단의 슬라이드 랙이 완전히 수평인지 확인하십시오. 그런 다음 슬라이드가 건조되는 동안 물기를 끓여야합니다.

8. 물기가 물기가 끓으면 끓는 물 위의 슬라이드 랙에 슬라이드를 놓습니다.<피>9. 미리 자른 종이 타월의 사각형 조각으로 슬라이드에 얼룩의 영역을 커버. 용지 중 어느 것도 슬라이드에서 매달려 있지 않은지 확인하십시오.<피>10. CARBOL FUCHSIN 얼룩을 종이 타월에 조심스럽게 바르십시오.

11., 종이 사각형이 결코 마르지 않도록 지속적으로 더 많은 얼룩을 적용하면서 7 분 동안 슬라이드의 얼룩으로 스팀을 바르십시오.<피>12. 포셉으로 종이를 부드럽게 제거하고 벤치에 제공 될 작은 폐지 컵에 버리십시오. 그런 다음 슬라이드를 물줄기로 헹굽니다.<피>13. 당신의 염색 물동이에 슬라이드를 넣고 부드럽게 물로 헹구십시오.<피>14. 6 방울의 산성 알코올(그램 얼룩 키트의 에탄올이 아님)으로 탈색 한 다음 물줄기로 헹굽니다.<피>15. 2 분 동안 메틸렌 블루로 카운터 스테인.<피>16., 물로 헹구고 bibulous 종이로 물기를 말리십시오(슬라이드 워머를 사용하지 마십시오).<피>17. 오일 침수로 100 배 대물 렌즈 아래에서 검사하고 결과를 기록하십시오.