Scopo e portata:
Gli organismi contenenti citocromo producono un enzima ossidasi intracellulare. Questo enzima ossidasi catalizza l’ossidazione del citocromo c. Gli organismi che contengono il citocromo c come parte della loro catena respiratoria sono ossidasi-positivi e trasformano il reagente blu/viola. Gli organismi privi di citocromo c come parte della loro catena respiratoria non ossidano il reagente, lasciandolo incolore entro i limiti del test e sono ossidasi-negativi.,
Le strisce OxiStrips™ Ossidasi sono strisce reattive pronte all’uso con un comodo manico in plastica in modo che l’utente possa evitare il contatto della pelle con l’area di reazione.
Reagenti e forniture:
- Hardy Oxistrips test kit
- Sterile H2O
- Sterile inoculating loop or stick
Conservazione dei reagenti
- Al ricevimento conservare a 15-30 gradi C.
- I prodotti non devono essere utilizzati se ci sono segni di deterioramento o se la data di scadenza è passata.
- Conservare OxiStrips™ e OxiSticks™ sempre con un essiccante nel flaconcino.,
- La data di scadenza si applica al prodotto nella sua confezione intatta se conservato come indicato.
Controllo di qualità:
Il controllo di qualità viene eseguito ogni giorno in cui viene eseguito il test. Utilizzare la procedura con coltura di P aeruginosa ATCC 27853 (ossidasi positiva) ed E. coli (ATCC 25922) (ossidasi negativa).
Record QC risultati sul test di ossidasi QC Log.
Procedura
- Posizionare la striscia reattiva ossidasi in una capsula di petri e inumidire un’area della striscia da testare con acqua. Non saturare la striscia.,
- Con un anello di inoculazione sterile o un bastoncino applicatore di legno, spalmare una pasta batterica da 3-4 colonie ben isolate sull’area inumidita. Usa colonie che hanno 18-24 ore.
- L’aspetto di un colore blu / viola entro 30 secondi indica un test positivo.
- Importante: qualsiasi colore che appare dopo questo tempo deve essere ignorato.
Limitazioni
Il test dell’ossidasi può essere utilizzato per la presunta identificazione di Neisseria spp. e nella differenziazione e identificazione dei bacilli gram-negativi., Tutti gli organismi ossidasi-positivi dovrebbero essere esaminati dalla macchia di gram per determinare la morfologia cellulare e la reazione di gram. Ulteriori test biochimici, utilizzando la coltura pura, sono raccomandati per l’identificazione completa.
L’uso di nicromo o altri dispositivi di inoculazione contenenti ferro può causare reazioni false positive.
Le reazioni ossidasiche dei bacilli gram-negativi devono essere determinate su colonie ottenute da mezzi non selettivi e non differenziali per garantire risultati validi.
La maggior parte di Haemophilus spp. sono ossidasi-positivi., Strisce reattive ossidasi meno sensibili o reagenti possono produrre risultati falsi negativi.
Organismi debolmente ossidasi-positivi, come Pasteurella multocida, possono richiedere più tempo per mostrare una reazione positiva sulle strisce reattive.
Si consiglia di utilizzare colonie vecchie di 18-24 ore. Le colonie più vecchie possono produrre reazioni più deboli.
Il test dell’ossidasi deve essere eseguito su isolati a temperatura pari o superiore a 15-30 gradi C.
Qualsiasi sviluppo del colore che appare dopo 30 secondi di inoculazione deve essere ignorato.