Recupero dell’uovo
Le uova (ovociti) vengono recuperate dai pazienti mediante aspirazione transvaginale direttamente dai follicoli ovarici, circa 36 ore dopo un’iniezione di HCG. A quel tempo, il fluido follicolare viene portato in laboratorio in modo che le uova possano essere identificate dagli embriologi Mentre gli ovociti maturano all’interno del follicolo in via di sviluppo, sono circondati da cellule cumuliformi che partecipano al nutrimento dell’uovo., L’uovo e il cumulo sono indicati come il complesso ovocita-cumulo.
Subito dopo il recupero, ogni complesso è individuato sotto un microscopio e poi trasferito in una soluzione speciale (“inseminazione media”) che è appositamente progettato per fornire tutte le sostanze nutritive e di altre sostanze necessarie per massimizzare la probabilità di successo della fecondazione delle uova con lo sperma.,
I piatti contenenti le uova vengono quindi posti in un’incubatrice, in modo che le condizioni ambientali che circondano le uova possano essere strettamente controllate per quanto riguarda le concentrazioni di luce, ossigeno e anidride carbonica, nonché il pH e la temperatura. Le cellule del cumulo vengono lasciate attaccate all’ovocita per almeno 4 ore dopo il recupero per consentire agli ovociti di completare la loro maturazione. Poiché le diverse procedure riguardanti lo sviluppo dell’ovocita e dell’embrione si verificano in giorni specifici, ci riferiamo al giorno del recupero dell’ovocita come “Giorno zero”.,
Fecondazione
La valutazione della fecondazione avviene valutando ogni ovulo il giorno successivo al prelievo dell’ovocita e cercando la presenza di due pronuclei. Un pronucleo contiene il materiale genetico contribuito dall’uovo; l’altro contiene il materiale genetico contribuito dallo sperma. La presenza di due pronuclei denota una normale fecondazione. Il pre-embrione in questo stadio cellulare è indicato come uno zigote, che è il primo stadio nello sviluppo dell’embrione., La presenza di un solo pronucleo generalmente significa che l’uovo è stato attivato, ma non vi è alcun contributo spermatico.
La presenza di più di due pronuclei, significa che più di uno spermatozoo è entrato ovocita o che l’ovocita non ha completato la sua maturazione del processo (che si verifica dopo che lo sperma entra l’uovo). Di conseguenza, c’è troppo materiale genetico materno presente perché un embrione normale si sviluppi., Questi zigoti che contengono più o meno di due pronuclei sono cromosomicamente anormali e, quindi, non possono mai svilupparsi in un bambino normale.
Coltura embrionale con mezzi sequenziali
In natura, la fecondazione avviene tipicamente nella tuba di Falloppio. L’embrione risultante viaggia lentamente lungo il tubo ed entra nell’utero, dove galleggia per diversi giorni prima di attaccarsi alla parete uterina., Lungo questo percorso, l’embrione è esposto a diversi ambienti biochimici – ognuno dei quali contiene i nutrienti particolari che l’embrione in via di sviluppo richiede in ogni fase della sua crescita prima dell’impianto. Cerchiamo di ricreare questo stesso ambiente nel nostro laboratorio di FIV attraverso l’uso di diversi media (soluzioni di cultura) in diverse fasi dello sviluppo embrionale.
La fecondazione avviene in terreni di coltura specificamente progettati per imitare lo stesso ambiente a cui un uovo sarebbe esposto nella tuba di Falloppio., Gli embrioni in ogni fase successiva dello sviluppo vengono coltivati in supporti simili a quelli che incontrerebbero mentre si fanno strada lungo il tubo nell’utero. Man mano che gli embrioni si sviluppano, le loro esigenze metaboliche cambiano. Pertanto, i nutrienti e altri substrati necessari per la loro crescita vengono modificati in sequenza per soddisfare queste esigenze.
Dopo lo stadio di sviluppo a 8 cellule, la divisione cellulare diventa più rapida e gli embrioni richiedono risorse aggiuntive dall’ambiente., Poiché i requisiti degli embrioni sono cambiati, è necessaria una diversa formulazione del mezzo per soddisfare meglio le esigenze di questi embrioni in fase successiva e altamente attivi. Avendo supporti specifici per le diverse fasi dello sviluppo embrionale (Fecondazione, embrione precoce e sviluppo della blastocisti) il laboratorio è meglio in grado di imitare ciò che gli embrioni starebbero vivendo se fossero ancora nel corpo della donna, cioè. “in vivo”., Da quando ha implementato l’uso di supporti sequenziali in laboratorio, Austin IVF ha visto significativamente migliorata la qualità degli embrioni con conseguente maggior numero di embrioni in via di sviluppo allo stadio di blastocisti.,
|
|
Embryo Transfer
Typically because you have a large number of nicely developing embryos – the embryos are allowed to continue to grow in the lab and the selection of the best embryos is made on day 5., Se il trasferimento è il giorno 3, gli embrioni scelti per il trasferimento sono di solito allo stadio di 6-8 cellule. Entro il giorno 5, gli embrioni dovrebbero essere allo stadio di blastocisti, momento in cui ogni embrione contiene circa 100-120 cellule. In questa fase l’embrione sta iniziando a differenziarsi. Le cellule destinate a diventare il bambino sono identificate come la “massa cellulare interna”. Le cellule intorno alla periferia dell’embrione sono chiamate trofectoderma e diventano la placenta. C’è uno spazio libero all’interno della blastocisti chiamato blastocele.,
Lo sviluppo del trofectoderma e della massa cellulare interna è altrettanto importante per lo sviluppo di una gravidanza sana.
Sebbene tu e il tuo medico decidiate il numero di embrioni da trasferire, il Texas Fertility Center e Austin IVF rispettano rigorosamente le linee guida sul trasferimento di embrioni stabilite dalla Society of Assisted Reproductive Technology (SART). Queste linee guida sono state sviluppate sulla base di un’ampia revisione della letteratura pubblicata nella speranza di massimizzare le possibilità di una coppia per la gravidanza, riducendo al minimo il rischio di una gravidanza multipla., Il numero di embrioni da trasferire è determinato da molteplici fattori, tra cui l’età dell’uovo e lo sviluppo degli embrioni. Una volta presa la decisione sul numero di embrioni da trasferire, il medico informa l’embriologo. Gli embriologi sono quelli che effettivamente scelgono gli embrioni specifici da trasferire.