espèces de staphylocoques et de streptocoques:
dans le laboratoire précédent, les plaques BAP et MSA ont été inoculées avec Staphylococcus et Streptococcus spp..
La gélose sanguine est un milieu riche et non sélectif qui favorise la croissance de la plupart des bactéries. Cependant, il est différentiel basé sur la capacité de l’organisme à produire des enzymes appelées hémolysines, qui lyse les globules rouges (RBC). Trois schémas d’hémolyse peuvent être observés sur une plaque de gélose sanguine.
1. Alpha (a) – hémolyse: lyse incomplète de RBC-zone verdâtre et trouble autour de la colonie.
2., Bêta (b) – hémolyse: lyse complète de RBC-une zone claire avec un bord propre autour de la colonie.
3. Gamma (g) – hémolyse: pas de lyse de RBC-pas de changement dans la gélose sanguine autour de la colonie.
MSA contient une forte concentration de sel (NaCl), et donc, sélectionne pour la croissance des microbes qui peuvent tolérer des concentrations élevées de sel. Les espèces de staphylocoques sont halotolérantes, tandis que les espèces de streptocoques et de nombreux autres organismes sont inhibées par de fortes concentrations de NaCl. MSA se différencie également sur la base de la fermentation du mannitol., Les micro-organismes qui peuvent fermenter le mannitol créent des sous-produits acides, qui diminuent le pH du milieu et font jaunir l’indicateur de pH, le rouge phénol.,
résultats attendus:
Staphylococcus aureus
- croissance sur MSA, fermente le mannitol provoquant un changement de couleur en jaune
- B-hémolyse sur BAP
Staphylococcus epidermidis
- croissance sur MSA, ne fermente pas le mannitol (le milieu reste rouge)
- g-hémolyse sur BAP
Streptococcus pneumoniae
- croissance limitée ou nulle sur MSA
- hémolyse a sur BAP
Streptococcus pyogenes
- croissance limitée ou nulle sur MSA
- hémolyse B sur BAP
les cocci à Gram positif sont souvent isolés des échantillons cliniques., Le test de catalase est un test particulièrement important utilisé pour déterminer si le gram + cocci est un staphylocoque ou un streptocoque. La Catalase est une enzyme qui convertit le peroxyde d’hydrogène en eau et en oxygène gazeux. Le test est facile à réaliser; les bactéries sont simplement mélangées à H 2O 2. Si des bulles apparaissent (en raison de la production d’oxygène gazeux), les bactéries sont catalases positives. Si aucune bulle n’apparaît, les bactéries sont catalases négatives. Staphylococcus et Micrococcus spp. sont catalase positive, tandis que Streptococcus et Enterococcus spp. sont catalase négative., Si un cocci Gram positif est catalase positive et présumé être un staphylocoque, le test de coagulase est souvent effectué. Ce test analyse la présence de coagulase, une enzyme qui coagule le plasma sanguin, et peut différencier Staphylococcus aureus (coagulase positive) et Staphylococcus epidermidis (coagulase négative)., Si, en revanche, un cocci à Gram positif est catalase négatif et considéré comme un streptocoque, les tests de sensibilité aux antibiotiques peuvent différencier les streptocoques pathogènes (Streptococcus pneumoniae et Streptococcus pyogenes) et les streptocoques floraux normaux (par exemple Streptococcus mitis).