Conform unui raport din Fibroza Chistică Fundație în 2005, Staphylococcus aureus este recuperat foarte frecvent din căile respiratorii ale fibroza chistica (CF) de pacienți (în medie, ∼52% dintre pacienți ) și este una dintre primele agenții patogeni recuperat de la sugari și copiii care suferă de CF (1, 3)., Metodele utilizate pentru a detecta și identifica acest organism în timp util și pentru a produce modele precise de susceptibilitate sunt importante pentru îngrijirea și rezultatele critice pentru pacienții cu FC.laboratoarele care efectuează culturi respiratorii pentru pacienții cu FC sunt conștiente de timpul necesar pentru a exclude sau a exclude agenții patogeni și furnizează date adecvate de susceptibilitate pentru acești agenți patogeni. S. aureus este doar unul dintre mai mulți agenți patogeni considerați a fi cruciali pentru detectarea la această populație de pacienți; alții includ Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia și spp înrudite.,, Stenotrophomonas maltophilia, Achromobacter xylosoxidans, Haemophilus influenzae și Streptococcus pneumoniae, precum și micobacterii și viruși. Deoarece culturile efectuate pe specimene colectate de la pacienții cu FC sunt consumatoare de timp și implică utilizarea multor tipuri de medii, mediile selective sunt adesea utilizate. Aceste medii minimizează creșterea florei normale și permit recuperarea mai ușoară a potențialilor agenți patogeni din microflora complexă a acestor specimene respiratorii., Unul dintre aceste medii selective este agarul de sare manitol (MSA), care este utilizat pentru recuperarea selectivă și diferențiată a izolatelor de S. aureus (care va apărea galben pe acest agar; stafilococii coagulazo-negativi vor rămâne culoarea agarului). Cu toate acestea, mediile neselective/nediferențiale sunt recomandate în prezent pentru utilizarea în efectuarea metodelor de identificare a S. aureus și prepararea suspensiilor pentru utilizarea în testarea susceptibilității pe un instrument Vitek-2. Pentru a reduce timpul și cheltuielile asociate cu identificarea și testarea susceptibilității S., aureus din culturile respiratorii de la pacienții cu FC, acest studiu a fost efectuat pentru a determina dacă MSA ar putea fi utilizată pentru identificarea definitivă, precum și pentru prepararea suspensiilor pentru testarea sensibilității în sistemul Vitek-2.
(o parte din această lucrare a fost publicată anterior .)
o sută de izolate de S. aureus, dintre care 69 erau rezistente la oxacilină S. aureus și 31 dintre acestea erau sensibile la oxacilină S., aureus, au fost recuperate de la pacienții cu CF din martie până în decembrie 2005, subculturate pe ambele agar de sânge (BA) și plăci MSA, și apoi testate pentru sensibilitate folosind carduri GPS-61 pe un instrument Vitek-2. Modelele de susceptibilitate au fost apoi comparate pentru orice rezultate discrepante., Pe de laborator de rutină protocol, aceste organisme au fost, de asemenea, testat de difuziune a discului pe un 100-mm Mueller-Hinton agar placa pentru susceptibilitatea la următoarele antibiotice: cefoxitin (ca o confirmare a oxacilină), trimetoprim-sulfametoxazol (ca nu este inclusă în bateria de antimicrobiene pe GPS-61 carte), clindamicina și eritromicină (pentru determinarea inductibile clindamicina rezistență), și vancomicină (ca o verificare pentru un film de creștere până la marginea discului ca o indicație de posibila rezistență la vancomicină).,în plus ,au fost revizuite cele mai recente rapoarte privind cultura respiratorie pentru toți pacienții cu FC cu specimene prezentate în anul 2005. Această revizuire a fost efectuată pentru a determina cât de des coloniile galbene detectate pe placa MSA au fost identificate definitiv ca S. aureus.nouăzeci și șapte la sută din cele 69 de izolate S. aureus rezistente la oxacilină și 31 de izolate sensibile la oxacilină recuperate de la pacienții cu FC au arătat un acord exact cu interpretările de susceptibilitate, indiferent dacă au fost prelevate din mediul MSA sau BA., Doar trei discrepanțe au fost observate la compararea rezultatelor testelor de sensibilitate obținute cu plăcile MSA sau BA.
două izolate au avut rezultate discrepante în ceea ce privește eritromicina. Într-un caz, izolatul testat de pe placa BA a fost rezistent în timpul testării intermediare de pe placa MSA; în al doilea caz, s-a observat invers (eritromicină intermediară pe placa BA și eritromicină rezistentă pe placa MSA)., În al treilea și ultimul caz, rezultatul discrepant a fost cu clindamicina; în acest caz, izolatul a fost rezistent la clindamicină atunci când a fost testat de pe placa BA și intermediar atunci când a fost testat de pe placa MSA. Toate cele trei izolate au fost testul d pozitiv și, prin urmare, ar fi fost raportate ca fiind rezistente la clindamicină și eritromicină pe baza testului D de difuzie a discului., Toate celelalte substanțe antimicrobiene, care a inclus ampicilina-sulbactam, cloramfenicol, gentamicină, quinupristin-dalfopristin (Synercid), rifampicina, oxacilină, cefazolin, linezolid, și vancomicină, au arătat aceleași rezultate pe GP-61 Vitek-2 card, indiferent de ce mediu a fost folosit pentru testare.cele mai recente rapoarte de cultură pentru toți pacienții cu FC cu specimene prezentate în anul 2005 (un singur raport per pacient a fost revizuit pentru a exclude duplicatele în cursul anului) au fost revizuite pentru a determina dacă coloniile galbene observate pe plăcile MSA erau de fapt izolate de S. aureus., Două sute șapte rapoarte au fost analizate și s-a constatat că în >98% din cazuri, în cazul în galben colonii au fost găsite în cantități de >1+ (1+ este definită ca o creștere numai în primul cadran al dungi) pe MSA placa, atunci organismul a fost în cele din urmă identificat ca fiind S. aureus după ce a fost subcultured pe o BA placă și testate prin metode de laborator de rutină (un diapozitiv testul coagulazei urmat de un tub testul coagulazei dacă este necesar).
MSA a fost folosit de mai mulți ani ca un mediu selectiv, diferențial pentru izolarea S., aureus și a fost mult timp recomandat ca unul dintre mediile selective pentru utilizarea cu specimene respiratorii ale pacienților cu FC (4). Recent, un nou agar selectiv, CHROMagar Staph aureus, a fost, de asemenea, raportat a fi util pentru utilizarea selectivă și diferențială cu izolatele S. aureus (2, 4). Flayhart și colab. (2) a raportat că identificarea S. aureus ar putea fi raportate la această medie, fără teste suplimentare cu specificitate de 100%, depășind 95% precizie cerința de CLSI (fosta NCCLS) M35-Un document pentru a folosi ca un nivel acceptabil singur test rapid pentru identificarea organismelor (2, 5)., În ceea ce privește această afirmație din studiul lui Flayhart și al colegilor, un recent Cumitech scris de Gilligan et al. (4) afirmă că „este foarte probabil ca rezultate similare să fie obținute cu MSA, dar această evaluare nu a fost făcută recent.”Peste 200 de rapoarte ale pacienților au fost revizuite în studiul de față pentru a evalua performanța MSA pentru detectarea S. aureus din culturile respiratorii CF, iar revizuirea a arătat că MSA poate identifica cu precizie S., aureus (>98%) în cazul buna cromogen reacție are loc și acolo este un >1+ nivel de adecvat galben colonii izolate pe mediu. Rareori, coloniile galbene în cantități ≤1+ au fost identificate fie ca stafilococi coagulazo-negativi, fie ca specii de Corynebacterium. Dacă coloniile galbene sunt cultivate pe MSA în cantități ≤1+ sau dacă se cultivă un amestec de organisme, atunci ar trebui să se procedeze la proceduri de izolare și identificare de rutină pentru a exclude prezența S. aureus în aceste culturi.,de asemenea, a fost evaluată capacitatea de a efectua teste de sensibilitate precise într-un instrument Vitek-2 cu izolate prelevate direct de pe plăcile MSA. S-a ajuns la un acord pentru 97% din izolate, cu doar trei izolate discrepante notate și cu un singur antibiotic per izolat în cauză. Aceste trei organisme au arătat abateri în ambele eritromicina (2 izolate) sau clindamicină (1 izolat) sensibilitatea, și nu discrepanțele s-au remarcat pentru determinarea prezenței de oxacilină (69 izolate) sau oxacilină sensibilitate (31 izolate). Din moment ce toate noastre S., izolatele aureus au fost, de asemenea, testate pentru prezența rezistenței inductibile la clindamicină cu testul D, izolatele au fost raportate în mod corespunzător ca fiind rezistente atât la clindamicină, cât și la eritromicină, deoarece toate cele trei organisme discrepante au fost pozitive la testul D. Acest lucru este similar cu rapoartele privind rezultatele de susceptibilitate precise din evaluarea utilizării coloniilor direct din mediul CHROMagar stafilococ aureus, efectuată de Flayhart și colegii săi (2).
În concluzie, deși studiul izolează S., aureus au fost subcultured pe MSA și BA plăci înainte de a fi testate pentru sensibilitate, s-ar putea în mod rezonabil rezuma la aceste constatări că testarea sensibilității în mod corespunzător pur, izolat, și incubate colonii direct de la MSA inoculat cu specimene ar putea fi realizat similare cu certitudine fără a fi nevoie de subcultură pe un mediu neselectiv înainte de testare. Sunt necesare studii prospective suplimentare care utilizează specimene clinice pentru a valida aceste constatări., În plus, organismele care prezintă caracteristica galben colonii pe MSA plăci la cantitățile de >1+ pot fi raportate ca S. aureus fără suplimentare de identificare, testare, cu >98% încredere. Aceste metode nu numai că poate reduce timpul necesar pentru detectarea și testarea sensibilității de S. aureus pentru această populație de pacienți, dar poate, de asemenea, reduce costurile de laborator, prin eliminarea unor subculturi mass-media și identificarea reactivilor utilizați în prezent în raportarea de S. aureus din CF exemplare., În plus, în utilizarea MSA la potențialul său Maxim în ceea ce privește culturile respiratorii CF, nu este nevoie de adăugarea unor medii selective mai noi și mai scumpe.