cel i zakres:

organizmy zawierające cytochrom wytwarzają wewnątrzkomórkowy enzym oksydazy. Ten enzym oksydazy katalizuje utlenianie cytochromu c. organizmy, które zawierają cytochrom c jako część łańcucha oddechowego, są oksydazo-dodatnie i zmieniają odczynnik na niebieski / fioletowy. Organizmy pozbawione cytochromu c jako części łańcucha oddechowego nie utleniają odczynnika, pozostawiając go bezbarwnego w granicach testu i są oksydazo-ujemne.,

paski oksydazy OxiStrips™ są gotowe do użycia paski testowe z wygodnym plastikowym uchwytem, dzięki czemu użytkownik może uniknąć kontaktu skóry z obszarem reakcji.

odczynniki i materiały eksploatacyjne:

  • zestaw testowy Hardy Oxistrips
  • sterylny H2O
  • sterylna pętla szczepiąca lub kij

Przechowywanie odczynnika

  • po otrzymaniu przechowywać w temperaturze 15-30 stopni C.
  • produkty nie powinny być używane, jeśli występują jakiekolwiek oznaki zepsucia lub upłynął termin ważności.
  • przechowywać OxiStrips™ i OxiSticks™ ze środkiem osuszającym w fiolce przez cały czas.,
  • data ważności dotyczy produktu w nienaruszonym opakowaniu, gdy jest przechowywany zgodnie z zaleceniami.

Kontrola jakości:

Kontrola jakości jest wykonywana każdego dnia wykonywania testu. Stosować procedurę z hodowlą stadną P aeruginosa ATCC 27853 (oksydaza dodatnia) i E. coli (ATCC 25922) (oksydaza ujemna).

Zapisz wyniki QC w logu QC testu oksydazy.

procedura

  1. Umieść pasek testowy oksydazy w szalce Petriego i zwilż obszar paska, który ma być badany wodą. Nie nasycaj paska.,
  2. za pomocą sterylnej pętli inokulacyjnej lub drewnianego aplikatora posmarować pastę bakteryjną z 3-4 dobrze odizolowanych kolonii na zwilżony obszar. Użyj kolonii, które mają 18-24 godziny.
  3. pojawienie się koloru niebiesko-fioletowego w ciągu 30 sekund wskazuje na pozytywny wynik testu.
  4. ważne: każdy kolor pojawiający się po tym czasie nie powinien być brany pod uwagę.

Ograniczenia

test oksydazy może być użyty do przypuszczalnej identyfikacji Neisseria spp. oraz w różnicowaniu i identyfikacji prątków gram-ujemnych., Wszystkie organizmy oksydazo-dodatnie powinny być zbadane przez plamę grama w celu określenia morfologii komórkowej i reakcji grama. Dodatkowe badania biochemiczne, przy użyciu czystej kultury, zaleca się do pełnej identyfikacji.

stosowanie nichromu lub innych preparatów zawierających żelazo może powodować reakcje fałszywie dodatnie.

reakcje oksydazy prątków gram-ujemnych należy oznaczać na koloniach uzyskanych z nieselektywnych i niezróżnicowanych mediów, aby zapewnić prawidłowe wyniki.

Większość Haemophilus spp. są oksydazo-dodatnie., Mniej czułe paski testowe oksydazy lub odczynniki mogą dawać fałszywie ujemne wyniki.

słabo oksydazo-dodatnie organizmy, takie jak Pasteurella multocida, mogą dłużej wykazywać pozytywną reakcję na paskach testowych.

zaleca się stosowanie kolonii, które mają 18-24 godziny. Starsze kolonie mogą powodować słabsze reakcje.

test oksydazy należy wykonać na izolatach w temperaturze 15-30 stopni C lub powyżej.

nie należy brać pod uwagę rozwoju koloru pojawiającego się po 30 sekundach szczepienia.