Biosynteza jednopłytkowej glikoproteiny z wykorzystaniem systemu transkrypcji i translacji wolnej od komórek wzbogaconego maszynerią do glikozylacji
szczepy bakterii i plazmidy w tym badaniu wykorzystano następujące szczepy E. coli: DH5a, BL21(DE3) (Novagen), CLM24 i Origami2(DE3) gmd::kan δwaal. DH5a był używany do klonowania plazmidów i oczyszczania., BL21 (DE3) został użyty do ekspresji i oczyszczania białka akceptora scfv13-R4DQNAT, które było stosowane we wszystkich reakcjach glikozylacji in vitro. CLM24 jest glikooptymalizowaną pochodną W3110, która niesie delecję w genie kodującym ligazę WaaL, ułatwiając w ten sposób akumulację wstępnie zmontowanych glikanów na Und-PP36. CLM24 został użyty do oczyszczania enzymu CjOST, ekstrakcji rozpuszczalnikiem…