sav-FAST
sav-fast folt egy differenciál folt azonosítására használt sav-fast organizmusok, mint a nemzetség tagjai Mycobacterium. A savgyors organizmusokat viaszszerű, szinte áthatolhatatlan sejtfalak jellemzik; mikolsavat és nagy mennyiségű zsírsavat, viaszot és komplex lipideket tartalmaznak. Ez a fajta sejtfal ellenáll a legtöbb vegyületnek, ezért a savas gyors organizmusok speciális festési technikát igényelnek.,
a savgyors festéshez használt elsődleges folt, a karbol-fuchsin lipidoldható és fenolt tartalmaz, amely segít a foltnak behatolni a sejtfalba. Ezt tovább segíti a hő hő (gőz) formájában történő hozzáadása. A gőz segít a viaszos réteg lazításában, elősegíti az elsődleges folt bejutását a sejtbe. A kenetet ezután egy nagyon erős színtelenítővel öblítjük, amely a foltot minden nem savas gyors sejtből eltávolítja, de nem áthatolja a savas gyors organizmusok sejtfalát., A színtelenített, nem savas gyors sejtek ezután felveszik az ellennyomást, amely esetünkben metilénkék.
1. Párban dolgozva készítsen három diát az alábbiak szerint (2 a biztonsági mentéshez, egy pedig a folthoz).
2. Jelölje meg az egyes csúszdákat, majd rajzoljon egy kört a csúszda közepére viasz ceruzával.
3. Készítsen emulziót minden egyes csúszdán 4 loopful Staphylococcus epidermidis-szel a húslevestenyészetből a csúszdára (ezek lesznek a sav-gyors negatív baktériumok).
4., Ezután adjunk hozzá egy loopful Mycobacterium chelonae-t (ezek a savgyors pozitív baktériumok), és keverjük össze a két baktériumot.
5. Hagyja, hogy a csúszda(k) levegője megszáradjon a csúszófűtőn (miközben ezek a csúszdák száradnak, készítse elő a csúszdákat a spórafoltra).
6. Miután a folyadék teljesen elpárolgott, melegítse fel a baktériumokat úgy, hogy háromszor áthalad a lángon.
7. Győződjön meg róla, hogy a főzőpohár tetején lévő csúszda teljesen sík. Ezután forraljuk fel a vizet, amíg a diák száradnak.
csak körülbelül 200 ml vízre van szüksége., Ha még többet ad hozzá, akkor az összes laboratóriumi időszakot várja, amíg a víz forrni kezd.
8. Miután a víz forr, helyezze a csúszkát a csúszdaállványra a forró víz felett.
9. Fedje le a kenet területét a csúszdán egy négyzet alakú darab PRECUT papírtörlővel. Győződjön meg róla, hogy egyik papír sem lóg le a csúszdáról.
10. Óvatosan vigye fel a CARBOL FUCHSIN foltot a papírtörlőre.
ha folt jelenik meg a forrásban lévő vízben, kérjük, hagyja abba, és dobja el a festett vizet a folyékony hulladék ártalmatlanításába. A karbol fuchsin füstje mérgező lehet.
11., Gőzölje le a foltot a csúszdán 7 percig, miközben folyamatosan több foltot alkalmaz, így a papír Négyzet soha nem szárad ki.
12. Óvatosan távolítsa el a papírt csipesszel, majd dobja el a padon található kis papírpohárba. Ezután öblítse le a csúszkát vízzel.
13. Helyezze a csúszkát a festőedényre, majd óvatosan öblítse le vízzel.
14. 6 csepp savas alkohollal (nem a gram-foltkészletből származó etanollal) színezzük, majd öblítsük le vízzel.
15. A metilénkék ellentartása 2 percig.
16., Öblítse le vízzel, majd szárítsa meg kétpólusú papírral (ne használja a csúszófűtőt).
17. Vizsgálja meg a 100x objektív alatt olajmerítéssel, majd rögzítse az eredményeket.
a kép színei a nyomtatás/másolás miatt kissé eltérhetnek.