G-Receptori cuplați cu Proteinele
G-receptori cuplați cu proteinele (GPCRs) răspunde la extracelular stimuli, cum ar fi hormoni, prin interacțiunea cu un G-proteine, transducția semnal de-a lungul membranei intr-celulare de interior. După activarea GPCR, subunitățile Ga leagă GTP și devin active, activând în continuare factorii de semnalizare în aval, cum ar fi enzima adenilil ciclază (AC), care sintetizează AMP ciclic (cAMP)., Proteinele G activate interacționează cu factorii de semnalizare din aval pentru a modifica producția de mesageri secundari, cum ar fi inositolfosfații, calciul și cAMP. GPC-urile care activează clasa Gi a subunităților Ga inhibă producția cAMP, iar GPC-urile care activează clasa GS a subunităților Ga activează producția cAMP. cAMP, la rândul său, activează proteina kinaza dependentă de cAMP, proteina kinaza A (PKA). Calea de activare PKA este un exemplu de cascadă de transducție a semnalului, în care legarea mai multor evenimente de semnalizare amplifică semnalul original din interiorul celulei., Pentru fiecare moleculă GPCR activată, multe proteine G pot fi activate și fiecare proteină g activă poate sintetiza multe molecule cAMP, continuând Cascada până la PKA și mai departe în aval.GPC-urile sunt foarte implicate în funcțiile pituicyte. Semnalizarea defectuoasă a fost demonstrată în adenoamele hipofizare. Mutațiile punctului Gsa au fost demonstrate în tumorile hipofizare secretoare de GH .Pertuit și colab. au analizat pe scară largă modificările Gsa în adenoamele secretoare de GH.singurele mutații identificate până acum fără echivoc și observate la 30-40% din tumorile secretoare de GH se referă la oncogena gsp., În ciuda variațiilor individuale mari ale MRN-urilor Gsa, nivelul proteinelor Gsa este întotdeauna mai mic în cazul tumorilor gsp pozitive (gsp+) comparativ cu tumorile gsp negative (gsp−). S-a sugerat anterior că activarea Gsa induce o schimbare conformațională care împiedică atașarea acesteia la membrane și crește rata de degradare a acesteia, ceea ce ar putea implica proteazomul .în plus față de oncogena gsp, a fost observată o supraexpresie a proteinei WtGsa într− un subset de adenoame gsp. Aproximativ 60% din aceste tumori gsp exprimă niveluri ridicate de Gsa în comparație cu celulele hipofizare umane normale., În PMAN locus (guanine nucleotide binding protein (proteina G), alfa stimularea activității de polipeptide 1), care hărțile de pe cromozom uman 20q13, constă într-o regiune complexă cu mai multe alternative de îmbinat transcrieri codare mai multe produse de proteine. În majoritatea țesuturilor umane, Gsa este exprimată bialelic, dar, în țesuturile specifice, Gsa este imprimată . În tumorile hipofizare, transcrierile care codifică Gsa sunt exprimate monoalelic, predominant din alela maternă . În aproape toate cazurile de adenoame somatotropice gsp+, mutația care activează GNAS apare pe alela maternă activă ., Este bine cunoscut faptul că dereglările de imprimare genomică pot afecta nivelurile de expresie a genelor și astfel pot participa la tumorigeneză. O relaxare puternică de imprimare, cu o expresie derivată paternal a Gsa, a fost găsită numai în tumorile gsp. Astfel, rămân de identificat alte mecanisme care ar putea explica supraexpresia WtGsa.proteinele Gs cuplu stimularea hormonală a diferiților receptori de suprafață celulară la activarea AC . Activarea AC duce la generarea campului intracelular al doilea mesager, care stimulează PKA, principalul efector de tabără., Fosfodiesterazele (PDEs) contribuie la complexitatea și specificitatea căii cAMP prin hidrolizarea cAMP. Acum este bine stabilit că tabăra este compartimentată în celule. Ca răspuns la o creștere a cAMP, PDEs poate fi activat direct prin PKA (adică, reglarea rapidă a feedback-ului) și/sau prin inducerea transcripției genei PDE (adică, reglarea pe termen lung) . Astfel, echilibrul spațiotemporal între activitățile PKA și PDE este un factor determinant în controlul semnalizării taberei.,
în absența inhibitorilor PDE, nu a fost detectabilă nicio diferență în nivelurile camp intracelulare între gsp+ și adenoamele gsp . Persani și colab. a demonstrat că stenogramele PDE4C și 4D, precum și cele ale PDE8, au fost supraexprimate în sgp+ tumori , care au fost corelate cu o creștere de șapte ori PDE activitate. Cele două proteine nucleare, proteina CREB și represorul timpuriu al taberei inductibile (ICER), sunt principalele și cele mai bine caracterizate ținte finale ale cAMP. Nivelurile ARNm ale factorilor de transcripție CREB și ICER sunt ambele crescute în tumorile gsp+., Nivelurile CREB fosforilate sunt similare în cele două tipuri de tumori, deși blocarea PDE induce o creștere a p-CREB (Fosfocreb) în tumorile gsp+. Aceste rezultate sugerează că o creștere a activității PDE ar putea contracara activarea căii cAMP și poate avea un impact asupra fenotipului tumorilor gsp+.pe lângă modificările căii cAMP în tumorile gsp+, mai multe linii de dovezi sugerează, de asemenea, existența modificărilor căii cAMP în adenoamele secretoare de GH care supraexprimă WtGsa. Niveluri relativ ridicate de MRNAS CREB sau ICER au fost observate în unele tumori gsp .,supraexpresia WtGsa sporește acumularea intracelulară a cAMP și stimulează calea cAMP (nivelul p-CREB). O creștere a transcripției dependente de CREB se observă, de asemenea, atât în prezența oncogenei gsp, cât și cu supraexpresia WtGsa în celulele GH3 .pentru a determina cu exactitate rolul modificărilor Gsa în inițierea și progresia adenoamelor secretoare de GH, Pertuit și colab., a realizat un studiu asupra celulelor hipofizare, constatând că inducerea expresiei oncogenei gsp inițiază o creștere considerabilă a activității AC, care este asociată cu o creștere a nivelului camp intracelular. O activare slabă, dar de lungă durată a AC, asociată cu o ușoară creștere a nivelului cAMP, este de asemenea observată ca răspuns la supraexprimarea WtGsa. cAMP scade progresiv în ciuda expresiei transgene continue, sugerând o potențială implicare a PDEs., Acest lucru poate reprezenta un al doilea mecanism de feedback în plus față de reglementarea posttranscripțională a oncogenei gsp .aceste mutații inhibă activitatea Gtpazei Gsa, ducând la activarea constitutivă independentă de ligand a cAMP, care are ca rezultat activarea transcripțională GH și proliferarea somatotropă printr-un CREB în promotorul Gh .în mod semnificativ, cantități mai mari de SER133FOSFORILAȚI și, prin urmare, CREB activat, au fost raportate în unele tumori hipofizare secretoare de GH comparativ cu nivelurile găsite în tumorile nefuncționale (NF)., Această activitate CREB mărită a fost evidentă chiar și în tumorile care nu au manifestat o mutație Gsa. Acest lucru ar sugera că activarea CREB poate avea loc printr-un mecanism independent de Gs . Este posibil ca polipeptidele stimulatoare/inhibitoare și hormonii steroizi eliberați de hipotalamus și organele endocrine periferice să modifice expresia genelor hipofizare și secreția hormonală .