ACID-FAST

Acid-fast stainは、Mycobacterium属のメンバーなどのacid-fast生物を識別するために使用される差分染色です。 抗酸性生物は、ワックスのようなほぼ不浸透性の細胞壁によって特徴付けられ、ミコール酸および大量の脂肪酸、ワックス、および複雑な脂質を含む。 このタイプの細胞壁はほとんどの化合物に耐性があるため、耐酸性生物には特別な染色技術が必要です。,

抗酸染色に使用される一次染色剤であるcarbol fuchsinは脂質溶性であり、染色が細胞壁に浸透するのを助けるフェノールを含む。 これは、熱(蒸気)の形で熱を加えることによってさらに助けられる。 蒸気はろうの層の上でゆるむのを助け、細胞の中の第一次汚れの記入項目を促進する。 塗抹標本は、すべての非酸速細胞から汚れを除去するが、酸速い生物の細胞壁に浸透しない非常に強力な脱色剤ですすがれる。, 脱色された非酸速細胞は、我々の場合にはメチレンブルーであるカウンターステインを、取ります。

1. ペアで作業し、以下の指示に従って三つのスライドを準備します(バックアップ用と汚れるための2つ)。

2. 各スライドにラベルを付け、ワックス鉛筆でスライドの中心に円を描きます。

3. スライドにあなたのブロス培養からのStaphylococcus epidermidisの4つのloopfulsが付いている各スライドの乳剤を準備しなさい(これらはあなたの酸速く否定的な細菌である)。

4., その後、Mycobacterium chelonae(これらはあなたの酸性高速陽性細菌です)の一つのループを追加し、一緒に二つの細菌を混ぜます。

5. スライドウォーマーでスライドを乾燥させます(これらのスライドが乾燥している間、胞子の汚れのためにあなたのスライドを準備して下さい)。

6. 液体が完全に蒸発したら、熱はあなたの炎を通してそれを三回通過することによって細菌を固定します。

7. 必ずスライドのラックの上にビーカーは完全にレベル。 その後、スライドが乾燥している間に水を沸騰させます。

あなただけの水の約200ミリリットルが必要です。, 多くを加えれば、あなたの水が沸騰するためにすべての実験室の期間を待っています。

8. 水が沸騰したら、沸騰水の上のスライドの棚にあなたのスライドを置きなさい。

9. プレカットペーパータオルの正方形の部分でスライド上のあなたの汚れの領域をカバーしています。 ていないかどうかの論文は、スライドを出します。

10. 慎重にペーパータオルにカルボフクシンの汚れを適用します。沸騰している水に汚れが現れた場合は、汚れた水を廃液処理で止めて捨ててください。 Carbol fuchsinからの発煙は有毒である場合もあります。

11., スライドの汚れを7分間蒸しながら、紙の正方形が乾くことはありませんので、より多くの汚れを連続的に塗布します。

12. 鉗子で紙を静かに取り出し、ベンチに用意されている小さな古紙コップに捨てます。 次に、スライドを水ですすいでください。

13. あなたの汚損の洗面器にスライドを置き、水で穏やかに洗いなさい。

14. 酸アルコール(あなたのグラムの汚れのキットからのないエタノール)の6つの低下と脱色し、そして水で洗いなさい。

15. メチレンブルーで2分間カウンターステイン。

16., 水ですすぎ、bibulous紙で乾燥したブロット(スライドウォーマーを使用しないでください)。

17. オイルの液浸の100X対物レンズの下で検査し、あなたの結果を記録して下さい。

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